作者emmam ()
看板Biotech
標題[求救] 細胞質/細胞核 蛋白質的分離
時間Tue Apr 29 20:56:15 2008
各位大大好!
想要問，分離細胞質/細胞核的protein之後，
有什麼方法可以檢查是否有分離完全呢?
(目前我只有跑過SDS-PAGE，發現protein的pattern不同，
但是某些分子量的蛋白質在質and核的部分都有出現)。
我的目的是在分離之後，
跑Wesern 看我的目標蛋白質有沒有進入細胞核。
查到相關的資料都只有敘述核/質分離的方法，
而沒有檢察是否分離完全的檢查。
此外，
這部分也打算做螢光染色，並以confocal觀察。
想請問一下，
用什麼染細胞核比較清楚呢?
最好是紅色螢光。
如果有什麼冒犯的地方，也請不吝指教。
謝謝!
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※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc)
◆ From: 218.166.233.14
1F：推 aggaci:有些蛋白質只在cytosol出現 如tublin 04/29 22:16
2F：→ aggaci:紅色 就PI吧 04/29 22:17
3F：推 liuse:核外染tubulin 核內就染histone吧 04/30 00:07
4F：推 blence:除非要看chromatin fraction,不然histone不好extract完全, 04/30 00:17
5F：→ blence:而且PAGE的％可能不在一般常用範圍,會很麻煩 04/30 00:18
6F：→ emmam:查到一個HCS CellMask,但核/質都會染上，有人用過嗎? 04/30 12:39
7F：推 jjogp:核外 tubulin 核內 lamin 05/01 14:17
8F：→ jjogp:通常paper有分核質的應該都有control才對 再多幾篇吧 05/01 14:20
9F：→ jjogp:多找幾篇 05/01 14:21
10F：→ emmam:謝謝! 謝謝! 我先試試看 ~ 05/03 00:59