作者hongdow (紅豆)
看板Biotech
標題[求救] 計算長在基材上的細胞數的方法^^
時間Tue Apr 29 01:11:36 2008
想請教各位前輩:
小弟想要算出長在材料上的細胞數目,雖然有曾經考慮過下面幾種方法:
1.將細胞切下來,再用血球計數板數,但因為細胞數目少的時候,
可能會有的問題是誤差會很大外,另一方面,基材的數量(n=12)又很龐大,很耗時和藥品
2.直接用顯微鏡拍照下來數,但因為細胞有些會產生聚集和重疊,根本無法算出那一團細包
的精確數目,而且細胞在基材上也不是分布很均勻,顯微鏡也只能拍局部的部位
3.使用流式細胞儀,但也必須先將細胞沏下來,但是因為我的基材很小,要切似乎
也沒那麼好切
所以想請教各位,有更好的建議嗎?
其中也有想到直接對細胞的DNA作定量分析,找出與細胞數目之間的關系,
這樣OK嗎??
那如果可行的話,有建議protocal嗎??
拜託了各位...THX^^
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※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc)
◆ From: 59.115.178.167
1F：推 tsubasawolfy:切<--trypsin? 04/29 01:22
2F：→ hongdow:是的,是用tyrpsin去切 04/29 01:24
3F：推 boblu:可能用confocal影像去重組3D嗎？ 04/29 03:57
4F：推 humwang:invitrogen有一組CyQuant DNA quantification kit 04/29 20:41
5F：→ humwang:也許能解決你的問題... 04/29 20:41
6F：推 hounda:是Scaffold嗎 還是一般試片 04/29 23:57
7F：→ hounda:我曾經想過 利用MTT 的方式 來作Scaffold內細胞 的定量 04/29 23:58
8F：→ hounda:不過 大部分 paper 的作法 是對DNA作定量 04/29 23:59
9F：→ hounda:如果錢多的話 還是用hu大的方式比較好 04/29 23:59
10F：→ hongdow:THX...我的算是一般試片啦..不過若用h大建議的方法, 04/30 00:14
11F：→ hongdow:似乎要用到使用多孔盤並可量測螢光的儀器> <"對吧? 04/30 00:16
12F：→ hongdow:這類的儀器似乎不常有ㄟ...怎麼半><" 04/30 00:19
13F：推 hounda:DNA content 好像有很多方式可以測量 不一定要螢光 04/30 13:02