作者hosaile (我和妳:))
看板Biotech
標題[求救] 濕式transfer的條件
時間Sat Apr 26 21:32:10 2008
我的protein是大約55kD的大小
我會用10%的PAGE去跑
之前用semi-dry的方式做transfer 效果一直沒辦法很好
transfer完用commassie blue染了以後 還是有滿多protein留在膠上
所以想試試看濕式的transfer
請問各位有經驗的版友, 你們進行的條件是如何呢?
感謝各位的回答了!
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※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc)
◆ From: 140.112.122.26
1F：推 lail:我用的條件是250mA,1小時,protein marker除了182kD位置的偶爾 04/26 23:22
2F：→ lail:會有殘留,其他時候膠都會是透明的,不過沒染過膠,不知道實際殘 04/26 23:23
3F：→ lail:留情形如何 04/26 23:23
4F：→ hosaile:謝謝你的回答喔~ 04/26 23:34
5F：推 chvkimo:我曾經400mA衝一個小時 但是要在冷房內 或放在冰箱 04/28 15:37
6F：→ chvkimo:還有transfer buffer不要re-use太多次 通常2~3次吧 04/28 15:38
7F：→ chvkimo:如果 buffer 暴露空氣太久 就換新的 04/28 15:39
8F：→ hosaile:感謝你! 04/28 16:41