作者aerogel (俏)
看板Biotech
標題[求救]冷凍切片及一些免疫組織染色相關
時間Tue Apr 15 23:06:48 2008
想請問板上的版友
小弟是做冷凍切片 切完sample後 會先把片子放在-20度冰箱
隔天做染色 染色前 我會先讓片子降至室溫 浸入Xylene 再以酒精覆水(100%->50%)
接著就是我的染色了 染色後 會發現我的支架會脫落 不是全部 不過也脫落不少
(我是將支架植入肌肉層中 所以取出後 支架會被fibrous tissue包覆住)
所以染色後 外圍的tissue可以被染出來 不過中間的支架會有部份被洗掉
請問有啥辦法可以盡量避免我的sample被洗掉嗎?
另外... 想請問一下
做免疫組織染色時 會用一種溶液做Blocking 請問Blocking是要做啥的呢?
麻煩解答了 感激不盡
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※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc)
◆ From: 61.224.54.62
1F：推 greenmoon00:通常blocking是為了阻絕抗體的不專一性結合~ 04/16 09:45
2F：推 oopa:不知道你浸入冷凍切片染色前浸Xylene的用意是? 04/16 11:42
3F：→ oopa:建議找個IHC完整protocol(含原理)讀,我記得abcam網站上可下載 04/16 11:43
4F：→ aerogel:因為我問賣包埋劑的sales 他跟我說要用xylene 04/16 22:04
5F：→ aerogel:要不然會洗不乾淨 我也覺得怪怪的 所以問問板上的各位 04/16 22:05
6F：推 iiidns:他說的是 封片前要用Xylene 04/17 10:29
7F：→ aerogel:我有明確問他 他說是染色前 不是封片前 04/17 12:32
8F：推 oopa:到目前沒看過這種protocol,建議你照一般步驟做觀察實驗的情況 04/17 21:25
9F：→ oopa:如果做得出來,protocol可以再微調細節,讓結果更漂亮清楚, 04/17 21:27
10F：→ oopa:而且個人懷疑Xylene的步驟可能與你提到的"洗掉"有關(純猜測) 04/17 21:27
11F：→ aerogel:好~ 我會試試 感謝鼎力說明 ^O^ 04/17 23:41