作者charlielg (chi)
看板Biotech
標題[求救] 有關cloning的問題?
時間Tue Apr 15 21:08:25 2008
我要將之前實驗室所留下來的cDNA進行蛋白質表現,
可是我發現之前留下來的cDNA量不足,無法進行之後
的實驗(recombinant plasmid的製造),所以自己想重
新利用pcr來量化這段cDNA,於是我利用當初夾出此段
cDNA的一對primer(實驗室留下來的)及以此cDNA當作
template進行pcr,並且所有pcr條件都依照當初選殖出
這段cDNA的條件來進行,結果發現目標片段濃度並不高(比原本cDNA濃度還低)
,我有是著增加template量,可是效果並無顯著改善,希望大家能幫幫忙!提供意見
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※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc)
◆ From: 220.133.102.249
1F:推 dankai:重新合cDNA~ 04/15 21:27
2F:推 ycchiang3377:換好一點的酵素,同時可考慮把primer重新合成 04/16 12:34
3F:推 tobaccolove: 增加primer量、增加cycle數 04/17 12:41