作者bigricebug (~~~~邁向巨塔~~~~)
看板Biotech
標題Re: [求救] zymography的band
時間Tue Apr 15 18:17:00 2008
※ 引述《percussionHA (在雲朵上失足 )》之銘言:
: 請問有做過實驗的各位
: 在以CBR染色後,並去染所得的band為何?
: 我之前做了幾次
: 都是CBR染完色 用以前底片顯影的燈箱照明
: 能看到的是整片藍色 但MMP9分子量處有較深藍色的BAND
MMP9分子量處應該會比background淡 因為substrate(gelatin)被MMP9大口吃掉
: 但查閱期刊 數據處理 都是黑底白BAND 類似DNA電泳膠片的結果
其實還是有論文是用彩色的圖片 只是掃描的方式不同而已
: 這次實驗我改用去染劑(因為老師認為我染太深,而LAB之前沒有其他人做過這個實驗)
: 結果
: 得到整片淺藍 BAND也不見了
去染的時間可能要拿捏一下 另外 配膠時的gelatin濃度也要注意
以及 MMP9的表現量到底足不足夠將膠裡的gelatin進行digest
以我現在做的MMP2為例 表現量非常高 染完後不太需要去染的動作就可以清楚看到band
我該如何改良呢?
: 謝謝各位前輩了
: : )
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