作者fc01 ()
看板Biotech
標題[求救]請問那裡有"單賣"鎂離子溶液
時間Tue Apr 15 16:19:16 2008
是這樣的,我做的PCR,鎂離子條件往往比一般的要高(2.5~4mM)
然後我用TAQ送的BUFF稀釋10倍是1.5,所以我以前就非常蠢的自己配了一罐鎂離子溶液
結果被老闆發現了罵到臭頭
然後我有試過用調整BUFF的量來調整鎂離子濃度
結果到了2.5~3.0mM就P不出來了(可是PAPER建議的量是4.0mM)
我讀過PAPER懷疑是鉀離子太高的原因,所以乾脆還是用原來1.5mM做,反正有東西就好了
少一點也無所謂
但是現在同實驗室的學妹也碰到類似問題:1.5mM嫌產物少,用BUFF調高會把鉀一起加下去
然後TAQ沒有附鎂離子....
所以我想問到底那家有單賣鎂離子的?
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※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc)
◆ From: 140.112.84.219
1F：推 sinwam:你問你買的taq的那一家啊!有的taq買來本身就有附一管了!! 04/15 17:23
2F：→ fc01:送的是含KCl和Tris-HCl的buffer,沒有單純的鎂離子溶液... 04/15 17:35
3F：推 h3250sam:有些貴一點的taq的buffer鎂離子是分離開來另外加的 04/15 18:45
4F：→ h3250sam:所以可以自己調整濃度 印象中好像是跑GC rich的taq 04/15 18:48
5F：推 JanChang:我實驗室買的Taq所附的鎂離子溶液是5mM，可以自己再稀釋 04/15 20:48
6F：推 kaifish:我們實驗室自己配製Tris-HCl和KCl的buffer,鎂也是自己配的 04/15 22:21
7F：→ kaifish:我們是用Takara Taq，不曉得適不適合您使用的Taq 04/15 22:22
8F：→ fc01:我們也是用TAKARA的.... 04/15 22:47
9F：推 cutebetty:直接跟廠商說要鎂離子分開的buffer,波士特跟Takara都有 04/19 16:18