作者lblackpig (小黑豬)
看板Biotech
標題[求救] transfer出問題!!
時間Fri Apr 4 22:49:45 2008
常常在transfer之後,發現transfer不均勻,如果用ponseaou S (一種可清洗的protein
染劑),可以發現membrane上的protein並不是整齊的band,常常出現歪七扭八的樣子,
混雜有空白的部份,完全不能transfer過去的感覺(面積頗大,不太像是氣泡)。我的
membrane是PVDF,使用前先以methanol浸潤,在用dd水清洗乾淨,泡在水裡直到要使用。
我的系統是hofer。請問有沒有人曾經遇到相似的情形?實驗室都沒有人遇過,只有我!
麻煩各位給點意見吧!
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※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc)
◆ From: 122.123.137.79
1F:推 runpapa0520:我水洗完會泡在transfer buffer裡,你轉完buffer燙嗎? 04/04 23:23
2F:推 tincta:我也是泡transfer buffer直到要transfer使用之前...... 04/05 01:44
3F:推 kirby0415:泡transfer buffer+1 04/05 08:52
4F:推 rrttyy6:我是先泡transfer buffer 之後轉到dd水 04/05 11:26
5F:推 liuse:你的machine是哪一種? 04/05 19:49
6F:→ lblackpig:機器是Hofer,濕式transfer,有用水冷卻,因此不會很燙 04/05 21:04
7F:→ lblackpig:家裏的人都用相同的系統,相同的membrane處理方式。 04/05 21:10
8F:推 allure1:PVDF泡完methanol,泡transfer buffer,就直接用 不泡dd水 04/05 21:49
9F:→ allure1:是不是transfer buffer的問題呢? 有試過現配嗎 04/05 21:51
10F:推 alaric:會不會是PAGE根本就跑成如此...怎麼轉也是一樣... 04/05 23:42
11F:推 allure1:對厚! 隨便拿點sample 跑跑page 然後先染染看 04/06 17:05
12F:→ lblackpig:buffer現配的,PAGE染過沒問題,超想哭的。 04/06 20:50
13F:→ allure1:把學長的PAGE切一半 拿來transfer XD 04/12 22:52
14F:→ allure1:所有的材料都跟大家一樣 只有操作人不同嗎 04/12 22:52