作者Popopon (螺旋)
看板Biotech
標題[求救] 關於protein定量...如果不經過lysis細胞
時間Mon Mar 24 08:25:02 2008
我們在收完細胞後,並不會加lysis buffer
而是直接將細胞加入sample buffer後,煮10min
就直接loading做western的分析,
因此我們會盡量將cell數目控制在相近的量才收下來
再利用internal control來比較protein的相對量。
但是最近想要試試看比較準確的定量方式,
可是因為要看的protein是核內的,
所以一般lysis buffer有時會無法完全取出protein,
我們比較過一些比較強的lysis buffer
和直接煮掉的western
發現我們要看的protein在lysis buffer中的含量明顯少於直接煮掉的sample
因此想要請問看看
是不是有可以不經過lysis細胞就能定另protein的方式呢? 謝謝
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﹏ *﹏ ∣ * ﹏﹏ * ﹏ 朵朵的浪花 隨著風的旋律悸動著 . .. . ..
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﹏ 遠方的黑暗 彷彿是一場夢的開始 .ˍˍ.
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╦═╦ 孤獨的夜裡 細細想著自己的瑣事 █ \●
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1F:推 liuse:我們家有用6M urea lyse細胞後sonicate 03/24 14:21
2F:→ liuse:之後還是可以測Biored 03/24 14:22
3F:推 hjhao:你可能要用到BIO-RAD的RC-DC, 但之前應該不能放DYE 03/28 21:28