作者kutoushinji (所有人都跟我犯沖嗎?)
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標題Re: [求救] 做了好多遍的clone，就是接不上去，why?
時間Wed Jan 23 01:43:45 2008
※ 引述《albertwang (會思考的魚)》之銘言：
: ※ 引述《kutoushinji (所有人都跟我犯沖嗎?)》之銘言：
: : 我是用TA後的plasmid來切我的insert
: 先問這兩個都是vector上還是自己設計的就是在primer上
: 如果都是在vector何不試試其他的不要用平頭的
酵素切位是我設計的
一個是平頭的一個是sticky的
: 再來就是
: 你的buffer 出問題了
: ATP額外加吧
: 除非你有習慣一買來就把BUFFEER分裝
: 不然滿容易ATP就壞了
: 還是接不上去
好的，我今天試試看換新的buffer
我們家都是分裝的，可能是我的buffer壞掉了
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◆ From: 140.130.98.66
1F：推 pizzicato:通常cloning出不來,假設沒有其他奇怪的原因(例如抗生素 01/23 11:24
2F：→ pizzicato:用錯XD) 一個是buffer壞掉,一個是vector或insert量不夠 01/23 11:24
3F：→ pizzicato:有一些比較罕見的狀況,問題出在 competent cell 01/23 11:25
4F：→ pizzicato:換一株high efficiency competent cell或用電的會好很多 01/23 11:25