作者kutoushinji (所有人都跟我犯沖嗎?)
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標題[求救] 做了好多遍的clone，就是接不上去，why?
時間Wed Jan 23 00:26:52 2008
我最近正在接一段基因
vector:5.8kb
insert:700bp
酵素切位:BamH1跟EcoRV
我切膠完之後，做膠純化
(ps. 可以順便問一下要如何做，純度跟濃度才會高?)
然後ligation時，insert:vector=3:1
放在4度下過夜
可是我一直做不出來，我也放過16度過夜
還是接不上去
想請高人指點迷津
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※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc)
◆ From: 140.130.98.66
1F：推 zoom8080:試試TA clone完，增量後再切來皆看看... 01/23 00:36
2F：推 albertwang:用真空抽乾就可以讓濃度變高囉 01/23 01:21
3F：→ kutoushinji:我做膠純化之後的260/230都是0.多，why? 01/23 01:47
4F：推 enisx:放室溫 o/n 試試 01/23 13:34
5F：推 ffeelling:我們老師說一邊blunt end一邊sticky end的最難接了 orz 01/26 18:17
6F：→ ffeelling:我也做過這樣的clone(RE不一樣) 也是試了很久 最後換別 01/26 18:18
7F：→ ffeelling:的RE了... 實在是沒時間耗阿 有原po可能換切位嗎? 01/26 18:20