作者pooldodo (破渡渡)
看板Biotech
標題Re: [求救] 掃描式電子顯微鏡量測細胞之固定動作
時間Tue Jan 22 21:37:33 2008
※ 引述《qkla (努力阿)》之銘言:
: 我想請問高手,因為sem我沒做過也沒看過
: 但學長是使用甲醛來固定高分子薄膜上面的細胞
: 分別40%,50%....這樣固定
: 所謂固定是怎樣呢,是將薄膜浸入甲醛一段時間這樣就可以了嗎
: ,還有固定完了的臨界乾燥手續,有強者可以說明看看嗎 ?
: 感謝大家
我不是高手,不過可以給你一點建議
一般固定是為了防止細胞在接下來的處理步驟過程中變形
所以我們會使用 paraformaldehyde 以及 glutaldehyde 做固定(可能拼錯)
甚至再使用 osmium 固定,防止細胞在脫水的時候變形
這邊濃度跟固定時間都依照樣品的不同而不同
我想你可以參考實驗室學長使用的濃度
但 formaldehyde 絕對不可能是 40 or 50%......
我想你這裡所謂的 40%, 50%...
指的應該是接下來脫水的步驟
因為樣品在上 CPD 前必須經過 ethanol or acetone 的脫水
這個時候我們會使用連續不同濃度的 ethanol or acetone 來脫水
因為你的 sample 是固定在特殊的薄膜上
我不知道你的問題在哪裡,也不知道你是固定在什麼樣的材料上
如果你還需要什麼樣的建議或幫忙
也許你可以把問題描述的更詳細一些
這樣我們也比較好之道你需要的是什麼樣的東西~~
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琴鍵有限
,琴藝無
限 ║╠
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若琴鍵無
止盡,彈不出弦
律......那是上帝之琴
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═══╗ --The Legend of 1900
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◆ From: 59.112.5.239
1F:推 littleable:glutaradehyde吧...真的拼錯 01/23 01:12
2F:→ pooldodo:這個字我每次都會拼錯...所以先預告了 結果還是錯了 orz 01/23 08:03
3F:推 puh1005:沒關係,倒是一樓也要加加油啦 Glutaraldehyde 01/23 10:18
4F:推 vandia:通常好像是用P4G5 分別是4%跟5% 01/23 23:50
5F:→ pooldodo:我是用P4, G2.5 G濃度高固定快,但有時候會處裡過度 01/24 06:06
6F:→ pooldodo:所以也可以在冰上反應,把反應時間拉長 01/24 06:06
7F:→ pooldodo:總之對每種樣品其實配方都不一樣 XD 01/24 06:07