作者willieh (willie)
看板Biotech
標題[求救]Protein從SDS-PAGEtransfer至PVDF的問題
時間Sat Jan 12 20:45:29 2008
請問各位,
我在做SDS-PAGE transfer至PVDF時,
發現我的Pre-stained marker變得很淡,
因此想請教各位,
protein有可能transfer過頭而離開PVDF嗎?
還是變淡是因為染劑脫離protein而已?
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※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc)
◆ From: 140.116.253.121
1F:推 mimosasky:用啥方法transfer? 過久的確是會讓ptn跑過頭~但以往經驗 01/12 20:55
2F:→ mimosasky:transfer完marker是會變淡~但membrane上仍有,做完WB後可 01/12 20:56
3F:→ mimosasky:染色看看 01/12 20:58
4F:→ tsubasawolfy:marker都會有建議用量吧@@ 01/12 21:02
5F:推 sGoat:怕跑過頭,可以用2張PVDF看看有沒有跑過頭,但是一般來說不會 01/12 21:07
6F:→ sGoat:變淡是正常,因為膠跟膜之間是有空隙的,不是100%貼合... 01/12 21:09
7F:→ sGoat:還有新買的marker比較不會有這種現象,會比較鮮豔... 01/12 21:11