Biotech 板


LINE

我提供我們實驗室做的方式 ※ 引述《cutebetty (Qb)》之銘言: : 以下是我在網路上找到的方法 : 我有用過是可以的 有興趣沒錢買kit的可以試試看 : 4x10(6次方) target cells collect the cell sample in 1.5 ml eppendorf tube : --> spin down : --> resuspend with 0.5 ml PBS in 1.5 ml eppendorf tubes 55ul of lysis buffer : (40 ml of 0.5 M EDTA / 5 ml of 1 M Tris-Cl buffer pH 8.0 / : 5 ml of 100% Triton X-100 / 50 ml of H2O) 細胞收集後先wash 一次 lysis buffer 我們用的濃度比較低 5mL 1M Tris-HCl pH8.0 5mL 0.5M EDTA 4.38g NaCl 2.5mL Triton X-100 in 500mL 每個tube加1mL 加完lysis buffer之後 直接放冰上30-60min 冰上之後 加入等體積的 (phenol/chloroform/Isoamyl alcohol 25:24:1)溶液 votex ,會有明顯乳白和水層兩層 以 13000rpm離心2-3min 中間會出現白色一層 取上層液 加入另一eppendorff中 再加入大約等體積chloroform , votex 以 13000rpm離心2-3min 取上層液 再加入大約兩倍體積100% EtOH ,1/10V NaoAc mix 後, -20度 沉澱至少半小時以上 取出離心13000rpm , 10min 去掉液體之後, 用70%EtOH wash一次 air dry 乾了之後 以含有RNase的ddH2O回溶大概 10-15ul的volume 放入37度水浴2hr 之後就可以用2% agarose gel 電泳 --



※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc)
◆ From: 61.223.96.177 ※ 編輯: Seal13 來自: 61.223.96.177 (01/07 22:04) ※ 編輯: Seal13 來自: 61.223.96.177 (01/07 22:04)







like.gif 您可能會有興趣的文章
icon.png[問題/行為] 貓晚上進房間會不會有憋尿問題
icon.pngRe: [閒聊] 選了錯誤的女孩成為魔法少女 XDDDDDDDDDD
icon.png[正妹] 瑞典 一張
icon.png[心得] EMS高領長版毛衣.墨小樓MC1002
icon.png[分享] 丹龍隔熱紙GE55+33+22
icon.png[問題] 清洗洗衣機
icon.png[尋物] 窗台下的空間
icon.png[閒聊] 双極の女神1 木魔爵
icon.png[售車] 新竹 1997 march 1297cc 白色 四門
icon.png[討論] 能從照片感受到攝影者心情嗎
icon.png[狂賀] 賀賀賀賀 賀!島村卯月!總選舉NO.1
icon.png[難過] 羨慕白皮膚的女生
icon.png閱讀文章
icon.png[黑特]
icon.png[問題] SBK S1安裝於安全帽位置
icon.png[分享] 舊woo100絕版開箱!!
icon.pngRe: [無言] 關於小包衛生紙
icon.png[開箱] E5-2683V3 RX480Strix 快睿C1 簡單測試
icon.png[心得] 蒼の海賊龍 地獄 執行者16PT
icon.png[售車] 1999年Virage iO 1.8EXi
icon.png[心得] 挑戰33 LV10 獅子座pt solo
icon.png[閒聊] 手把手教你不被桶之新手主購教學
icon.png[分享] Civic Type R 量產版官方照無預警流出
icon.png[售車] Golf 4 2.0 銀色 自排
icon.png[出售] Graco提籃汽座(有底座)2000元誠可議
icon.png[問題] 請問補牙材質掉了還能再補嗎?(台中半年內
icon.png[問題] 44th 單曲 生寫竟然都給重複的啊啊!
icon.png[心得] 華南紅卡/icash 核卡
icon.png[問題] 拔牙矯正這樣正常嗎
icon.png[贈送] 老莫高業 初業 102年版
icon.png[情報] 三大行動支付 本季掀戰火
icon.png[寶寶] 博客來Amos水蠟筆5/1特價五折
icon.pngRe: [心得] 新鮮人一些面試分享
icon.png[心得] 蒼の海賊龍 地獄 麒麟25PT
icon.pngRe: [閒聊] (君の名は。雷慎入) 君名二創漫畫翻譯
icon.pngRe: [閒聊] OGN中場影片:失蹤人口局 (英文字幕)
icon.png[問題] 台灣大哥大4G訊號差
icon.png[出售] [全國]全新千尋侘草LED燈, 水草

請輸入看板名稱,例如:BabyMother站內搜尋

TOP