※ 引述《[email protected] (不以物喜不以己悲)》之銘言： > 我用293A cells > 第一天 1 x 10六次方 seeding 在10cm dish > 第二天 transfection (用CaCl2) > 第三天 reseeding to 12 wells plate > 遇到的問題是 第三天 加入trypsin後 細胞仍然貼的很緊不下來 > 大家都怎麻處理呢? 有人用刮的過嗎? > 謝謝大家 用刮的應該是取 lysate 用的... 可以改進的地方： 舊的培養液抽掉以後 用 PBS 洗兩三次 確定洗淨絕大部分的培養液 trypsin 回溫到 37C trypsinize 放到 incubator 裡面一分鐘或更久 再不行，加 EDTA 試試看（詳細 propocol 自己上網查） -- 莫非定律: 到了期末才會想起期初曾選了一門課卻一直沒去上 補充定律: 拿到成績單才發現上了一學期的課忘了去考期末考 -- ※ Origin: 生命科學 BBS <bbs.life.nthu.edu.tw> ◆ From: cpe-66-61-25-6.neo.res.rr.com