作者ppta (幸福的瞬間)
看板Biotech
標題[求救]電泳一定跑得出限制脢切的兩個片段嗎？？
時間Mon Dec 17 23:07:26 2007
如題，918bp應該切出615 245和58bp的，但我的電泳只看得到615，這樣是不是做錯了？
理論上有切出615應該還要有245的吧，而且亮度要一樣是嗎？
paper是寫58bp看不到，但245咧？這樣能判斷嗎？謝謝
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◆ From: 210.69.153.120
※ 編輯: ppta 來自: 210.69.153.120 (12/17 23:08)
1F：推 dankai:你的gel是幾%的~ 12/17 23:09
2F：推 bluecsky:理論上..615的要比245的亮才正常吧?..還有你gel幾%? 12/17 23:10
3F：→ ppta:2%的，還是因為我的BAND太微弱，615已經弱了，所以 12/17 23:22
4F：→ ppta:245看不到？ 12/17 23:23
5F：→ ppta:這個版好溫馨 人數少少的 回答數度比某些幾百人大版還快 12/17 23:23
6F：推 dankai:嗯!!你的band太弱了~再試試吧~你去切的可能再加一點!加油 12/17 23:28
7F：推 bluecsky:假如615就很weak..245自然很難看到.. 12/17 23:46
8F：推 sinwam:妳有嘗試去跑你pcr產物嗎??也許該調整一下條件吧!! 12/18 00:00
9F：→ ppta:是喔？各位高手認為有看到615不能研判型別嗎？ 12/18 00:04
10F：推 Crandy:你原來的DNA的量太少才會這樣，請試著加大原來DNA的量試。 12/18 00:02
11F：→ ppta:另為另一種型別切成860跟58BP 12/18 00:04
12F：→ ppta:不能因為我跑出615就研判型別嗎？謝謝 12/18 00:05
13F：推 sinwam:會有問題!也會被質疑!因為你說你的615太淡!所以建議再調整 12/18 00:04
14F：→ ppta:因為我現在是在職生，所以比較沒時間做實驗 12/18 00:06
15F：→ ppta:想知道這樣能研判嗎？感恩啊 12/18 00:06
16F：推 dankai:band太淡~被提出質疑的機率很大!該出來的band都出來才能正 12/18 00:14
17F：→ dankai:確判讀~~~~當自己沒辦法確定時!怎麼說服別人呢~對吧! 12/18 00:16
18F：推 NKTcell:615很淡的話 245有可能會看不到 2%的膠正常可以看到245的 12/18 08:19
19F：→ NKTcell:除非你有跑跳海XD 12/18 08:20
20F：→ NKTcell:另外 2%的膠100bp左右的也看的到喔~ 12/18 08:21
21F：推 yucmbuu:染色的方法及時間也會影響到觀察,小片段容易在染色時擴散똠 12/18 22:48
22F：→ yucmbuu:開而看不見,建議在做膠時直接將ethidium bromide加進去, 12/18 22:50
23F：→ yucmbuu:然後先空跑十分鐘再加入樣品,跑完直接觀察,可能比較容易 12/18 22:52
24F：→ yucmbuu:觀察到小分子量片段. 12/18 22:54
25F：推 jbking:用哪種enzyme阿 至少要提一下吧 12/21 11:09