作者littlebu (LittleBU)
看板Biotech
標題Re: [求救] 請問Anti-goat二抗的Blocking要用？
時間Wed Dec 12 09:58:02 2007
※ 引述《[email protected] (六百)》之銘言：
: ※ 引述《[email protected] (LittleBU)》之銘言：
: Blocking with 5% normal serum from the host species of the secondary antibody
: 以你的狀況來說 也就是 normal rabbit serum
我手邊沒有normal rabbit serum
所以我可能會試試借得到的normal donkey serum
希望沒有更多問題產生 Orz
: 用 mouse ab 抗 mouse protein 就有怪到了吧？
: 解決方法，用 protein A/G beads 來給你的 lysate 作 pre clean 吧
因為大多數的monoclone都是mouse source
然後我們老師又特別愛用monoclone
所以...
謝謝您的回答
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◆ From: 163.15.175.107
※ 編輯: littlebu 來自: 163.15.175.107 (12/12 09:58)
1F：推 zeratul1396:你是怎麼確定背景是因為二抗造成的阿?? 12/12 17:23
2F：→ littlebu:因為有做只處理二抗的control,還是有背景,所以跟一抗無關 12/12 20:54
3F：→ littlebu:而同樣的blocking對anti-mouse的二抗就沒有背景 12/12 20:55
4F：→ littlebu:所以才會想說應該是anti-goat二抗的問題 12/12 20:57
5F：→ julyselina:不好意思..問個問題~一般做monoclonal Ab都是要先將 12/13 01:36
6F：→ julyselina:antigen打入mouse體內產生immune response,所以如果是 12/13 01:37
7F：→ julyselina:anti-mouse的Ab不就等於老鼠會產生自體免疫??頗怪說 12/13 01:38
8F：推 boblu:小怪，不過也不是沒有辦法 12/13 13:28