作者littlebu (LittleBU)
看板Biotech
標題[求救] 請問Anti-goat二抗的Blocking要用？
時間Tue Dec 11 18:39:34 2007
一抗是Goat anti-mouse的抗體
二抗是Rabbit anti-goat IgG
現在的問題是在western的時候會有background
membrane是用5%脫脂奶粉blocking 1hr
上網查到是說anti-goat IgG會跟bovine的IgG作用形成背景
所以脫脂奶粉或BSA皆不適合拿來Blocking
http://www.listarfish.it/lsf/jackson/Jack_BAG_IgG.html
那請問各位還有什麼適合拿來Blocking
另外我在做的是mouse tissue protein
有幾支一抗是mouse monoclone antibody
但是二抗的goat anti mouse會有non-specific binding
換過一家的二抗也一樣
請問有什麼方法可以將total protein內本來的mouse IgG去除掉？
謝謝大家，請多指教
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※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc)
◆ From: 163.15.175.107
1F：→ qqo8855436:我們lab.都用安佳脫脂奶粉 12/12 18:46
2F：→ qqo8855436:blocking完用pbst rinse一下換個一次水就好 試試.... 12/12 18:47
3F：→ littlebu:我也是用安佳,blocking完還TBST洗了也一樣有背景 12/12 20:50
4F：→ littlebu:所以才很頭痛,因為anti-mouse的二抗就不會有背景 12/12 20:51
5F：推 qqo8855436:1抗玩後 wash多換幾次buffer 12/13 23:54