作者buterscotch (##)
看板Biotech
標題Re: 菌液養太久(菌死光)plasmid會不會不見？
時間Thu Dec 6 01:03:54 2007
因為Amp在室溫之下太久是會失去功能的
所以養菌養太久的時候
37C 的高溫就會把Amp給弄壞掉
那就沒辦法提供有利的條件讓有plasmid的那些菌生長
既然沒什麼好處的話
那plasmid的製造就會變沒啦
（plasmid上面有Amp resistance的基因）
大致上我想應該就是這樣吧
說得不是很清楚
還有一個可能就是你的菌死了
如果要永久保存的話
請加Glycerol (大約一比一） 然後冰到 -80 C
要用的時候抽個 5 lambda 出來就可以養 成 10 ml 左右的 culture 了
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◆ From: 124.185.130.232
※ 編輯: buterscotch 來自: 124.185.130.232 (12/06 01:06)
1F：→ njp13:我瞭解您的意思，但是已經產生具有plasmid的菌是不是會在死 12/06 01:06
2F：→ njp13:亡後，plasmid也會被分解呢？ 所以之前產生的也抽不到 12/06 01:07
3F：推 HCCY:我印象中保存plasmid的菌株 有把一些DNAse基因KO 12/06 02:35
4F：→ HCCY:所以你說養太久抽不到 其實我覺得不太可能 12/06 02:36
5F：推 bioeric:就抗生素熱掛了,菌不再需要plasimd保命,於是就被踢出菌外 12/06 20:13
6F：推 HCCY:但我還是不認為養48小時就會完全抽不到 12/07 00:22
7F：→ HCCY:你說的事情會發生 但是要到完全抽不到 至少要轉養到不含amp 12/07 00:24
8F：→ HCCY:的LB 2-3代以上 才會大部分的菌都沒有plasmid 12/07 00:24
9F：推 HCCY:^^第 12/07 00:27
10F：推 tankcase:請問 若將小量菌貯存在4度C,貯存多久算老化? 12/07 21:21
11F：推 buterscotch:存在 4C 一星期左右應該都沒問題。然後在沒 Amp 的 LB 12/07 22:50
12F：→ buterscotch:的菌會沒有plasmid是我親身的體驗。 :P 12/07 22:50
13F：推 HCCY:我也曾經忘記加Amp養菌 但是還是有抽到plasmid 12/08 00:18
14F：推 njp13:結果我送新鮮的菌液給他們 就定出來了..可見真的是amp熱掛 12/08 10:45
15F：→ njp13:造成雜菌叢生 使原本目標菌種被抑制掉，或者是plasmid被吐出 12/08 10:45
16F：→ njp13:菌體 接著被分解了 12/08 10:46