作者lazyQ (認真過每一天)
看板Biotech
標題Re: 菌液養太久(菌死光)plasmid會不會不見？
時間Wed Dec 5 22:39:18 2007
※ 引述《njp13 (.....)》之銘言：
: 之前因為KIT可能受到污染
: 所以抽出來的plasmid都不見了
: 在得知送sequence可以直接送菌液過去
: 我上週日就從凍起來的stock抽一點放到2ml LB broth養
^^^^^^^^^^^^^^^^^^
LB Broth養完之後咧？你該不會就整根eppendorf寄過去吧@@
這樣不死才奇怪。
正常要 從stock沾菌，再用tip戳到LB Arga裡面(LB arga內含抗生素)
再寄出去。這樣即使廠商晚個2天才養菌也沒關係。
: 週一讓定序商收去作
: 隔了一天，今天(週三)定序商來電說抽不到plasmid
: 我第一個直覺是 他該不會把我的菌養超久才作吧？
: 所以就問他什麼時候幫我抽plasmid 什麼時候作定序的？
: 他說週二還是今天幫我抽的
: 也就是說我的菌在那2ml 的medium裡面養了超過48小時(或更久)
: 養這麼久 菌早死光了
: 但想一想
: 這樣的狀況下plasmid會因為菌死光而抽不到嗎？
: 不知道plasmid抽不到會不會是因為菌養太久的關係呢？
: 最近一直出問題
: 再不行就要整套砍掉重練了..
: 麻煩各位大大解惑阿
: 感謝!
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◆ From: 134.208.24.2
1F：推 njp13:沒有耶..他是直接來收的..他有收菌液的sample型式 所以應該 12/05 23:05
2F：→ njp13:不用像您所敘述的那樣處理 12/05 23:07
3F：→ njp13:所以您的意思是 菌死掉plasmid抽不到是正常的囉？ 12/05 23:10
4F：推 satasumi:菌死掉抽不到是正常的啊,因為菌都死光了怎麼induce 12/05 23:50
5F：推 boblu:最好抽 plasmid 還要 induce 啦 12/06 05:43