作者xmanxpower (188)
看板Biotech
標題[求救] 關於利用P. pastoris表現的問題?
時間Fri Nov 30 21:01:27 2007
我是利用pPICZalphaC為載體以及SMD1168H為宿主
我要表現蛋白酶
問題一、
我看protocol上說明
當要表現重組蛋白時
菌要先活化到OD600=2~6
然後離心去除上清液後
pellet要用broth回溶至OD600=1
然後培養
我想問回溶到OD600=1是怎麼做的？？這一步驟
還需要注意啥事項嗎？
問題二、
在培養後
每24小時都要添加甲醇誘導
請問一下甲醇添加的量可以過量嗎？我有看過加到2％
protocol是寫添加到final conc.為0.5%
問題三、
在培養Pichia時
請問1 Liter的三角搖瓶最多裝多少broth?
搖瓶底部是有凹槽？還是平底的就好？
謝謝
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感恩
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◆ From: 140.121.156.183
1F：推 huangsw:1.應該是指離心後 resuspension 到 OD600=1 12/01 14:21