作者pocheng0227 ()
看板Biotech
標題[問題]prokaryote可以做3'RACE嗎?
時間Fri Nov 23 15:10:19 2007
如題, 請教板上的高手
我想要clone某個bacteria的full length gene
長度約2.4kb, 目前已知中間約1 kb的序列
我去查其他人的研究
一般做RACE(rapid amplification cDNA ends)都是真核的生物
mRNA 3'端有poly A tail, 可以用poly T的primer
那原核生物的mRNA沒有poly A tail, 要怎麼做3'RACE呢? @@
謝謝^^
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◆ From: 140.112.7.59
※ 編輯: pocheng0227 來自: 140.112.7.59 (11/23 15:14)
※ 編輯: pocheng0227 來自: 140.112.7.59 (11/23 15:14)
1F：推 winjj:個人看法: 原核可以不考慮intron的問題, 所以做Inverse PCR 11/29 00:17
2F：→ winjj:去看已知片段周圍的序列吧(用Genomic DNA做) 11/29 00:18
3F：→ winjj:得知序列後, 再用PCR Amplify做clone即可 11/29 00:19