作者iamrim (\笨小孩)
看板Biotech
標題[求救] 關於stable transfection的問題....
時間Wed Nov 14 21:28:06 2007
利用transient transfection將expression vector(抗G418)送入後
(跑western 確定有送入)
已經用不同濃度gradient G418來篩選
不管用哪一種濃度的G418篩選
細胞總會出現狀態不好(細胞皺縮.....等)
與正常健康細胞不太相同
我還要繼續篩下去嗎?!@@真猶豫...
各位大大會出現此種細胞狀況不好的情形嗎?.......囧
p.s第一次做stable clone.....就遇到瓶頸>"<
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※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc)
◆ From: 140.117.188.9
1F：推 vancent:stable clone不是那麼好做的~加油xd 11/14 21:29
2F：推 blence:出現"此種"細胞狀況不好...是那一種? 沒交代是沒人救得了的 11/14 23:12
3F：推 iamrim:細胞株是用 CL1-5.....肺腺癌細胞 11/14 23:25
4F：推 sokolova:本實驗室篩出的 stable clone和 parent cell也是長的不一 11/15 00:07
5F：→ sokolova:樣，而且養久了就換新的細胞，因為他變了 11/15 00:08
6F：推 albertwang:這應該是楊院長家都要用的cell去那請問一下比較快 11/15 00:24
7F：推 wangba:有試試沒有transfect的細胞單獨加G418嗎? 11/15 20:54
8F：推 iamrim:有......細胞在約4天到7天,每天都有細胞飄起來.... 11/15 22:20
9F：→ iamrim:直到沒有細胞.... 11/15 22:24
10F：→ iamrim:不過學姐有叫我在挑stable clone約第7天改用20%FBS medium 11/15 22:24