作者pent (情人去死)
看板Biotech
標題[求救] 如何做好 real-time PCR?
時間Tue Nov 13 00:54:35 2007
我的cDNA是一年多前翻的
濃度應該是16ng/ul
一直都冰在-20。C
用18S RNA當作internal control
每次都做duplicate,total 15 ul
今天作出來的結果
18S的duplicate CV都在0.5以下
但我的target gene 做4組
有3組CV超過0.5
版上的高手能不能給些做Q-PCR該注意的建議
或者說說做Q-PCR自己的一些小方法，來防止duplicate跑掉
現在覺得很沮喪，這個問題困擾我三個禮拜了
無法確定到底是我技術的問題
還是cDNA不穩定所導致 Q.Q
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◆ From: 163.25.118.144
1F：推 pluto2:如果cDNA是用dT primer做出來的，rRNA可能沒有辦法保存下來 11/13 07:49
2F：推 pent:cDNA primer是用randome hexamer做出來的 11/13 09:29