作者dankai (尋訪美妙好滋味)
看板Biotech
標題[討論] IEF電壓上不去!
時間Sun Oct 21 10:16:40 2007
最近在跑IEF時 電壓就是沒辦法上到原本設定的8000V
通常我們解決的方法
不就是多清洗幾次protein 讓鹽類降低
或者說IPG buffer濃度不要太高影響他的導電度
我想請問板上的大哥大姐們 <(_ _)>
大家會用什麼方法增加它的導電度或降低本身的鹽類
還是溶解protein的sample buffer 裡面的urea也會影響!?
謝謝!<(_ _)>祝大家實驗順利!
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小弟最近洗那些sample 洗到在度估!真該死> <
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◆ From: 140.127.27.83
1F：推 toasting:用acetone先沉澱看看 10/21 11:25
2F：推 dankai:謝謝一樓!^^ 我目前就是用acetone沉澱的! 10/21 12:24
3F：推 belady:我之前跑電壓也都上不去 不過安培數有到我的設定值 10/21 14:38
4F：→ belady:大約過了一個小時 電壓才慢慢衝上去 10/21 14:38
5F：推 skyken10:用90%的acetone洗洗看~可能會讓更多的鹽類溶解出來~! 10/22 02:09
6F：推 dankai:^^謝謝大家~ 如果使用100% acetone效果會不會更佳!? 10/22 08:34
7F：推 piparing:可先把100% ACETONE冰在-20後 直接拿來WASH pellet 10/22 19:07
8F：→ piparing:另check ampholyte buffer的final濃度是否超過建議用量 10/22 19:07
9F：→ piparing:即IPG buffer... 10/22 19:08
10F：→ piparing:正常情形應是可直接到達8000 若需過一段時間才能上去 10/22 19:09
11F：→ piparing:可回頭CHECK版友所提的所有問題... 10/22 19:09
12F：→ piparing:應是salt過高 致conductivity過大 使A變大 V上不去 10/22 19:10
13F：推 dankai:感謝P大~~^^~ 目前電壓已經上去!我把IPG buffer濃度降低~ 10/22 23:43
14F：→ dankai:雖然是慢慢爬上去...我會在check一下!^^~ 祝大家實驗順利! 10/22 23:44
15F：推 silverberry:我以前是用 70% 冰冷 Acetone 洗 30 次以上 10/23 14:23
16F：→ silverberry:sample 是植物非水溶性蛋白~~ 效果勉強可以看~~ 10/23 14:24
17F：推 dankai:S大~我佩服你!!@@~30次....我洗十幾次洗到在度估! 10/23 15:04
18F：→ dankai:我的sample也是植物的非水溶性蛋白! 加油~ 10/23 15:05
19F：推 piparing:洗30次...sample會不會lost掉太多阿? 10/25 01:12
20F：推 skyken10:哇塞~好厲害喔~洗30次~這樣一整天就沒了~!佩服佩服~! 10/25 23:20