作者shiouchou ()
看板Biotech
標題[問題] western blotting
時間Thu Aug 30 11:56:10 2007
想請問一下
我最近western blot 的時候
常常會出現membrane 在加完ECL 後
整片發螢光的現象
導致之後壓片結果是片子ㄧ片黑 (形狀就是membrane 的形狀)
可是我之前依照相同的實驗條件跟藥品
實驗都不會這樣 (例如:前ㄧ天做都正常 隔ㄧ天就整片黑)
想請問是什麼原因可能會照成這樣的結果
謝謝大家
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※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc)
◆ From: 140.109.90.199
1F：推 bigricebug:有可能是二抗wash不乾淨或底片本身曝光過.參考看看囉^^ 08/30 12:15
2F：推 kaifish:在暗房中就看到整片發螢光的現象，有可能是Wash的問題喔~ 08/30 12:39
3F：推 newivan:有可能沒block好,1抗.2抗皆粘到membrane上,so............ 08/30 16:07
4F：推 realism:應該是blocking的問題 你的blocking是? milk? reused BSA? 08/31 17:47
5F：推 dorphilvet:2抗濃度太高、blocking濃度不夠，wash不乾淨^^ 09/03 15:35