作者oddesy (馬車從天上掉下來 N)
看板Biotech
標題Re: [方法] 如何在plasmid上加Bgl II sites?
時間Thu Jul 5 01:38:21 2007
※ 引述《[email protected] (JUAN)》之銘言：
: ※ 引述《[email protected] (馬車從天上掉下來 N)》之銘言：
: > 回到家可以打中文了 呼呼
: > 我沒有作 mutation 想在plasmid 上加Bgl II sites
: > 我需要在我的plasmid上加上兩個Bgl II sites 才能跟廠商賣
: > 的vector作ligation
: > 會有這個限制是因為現成的vector上的restriction enzyme sites
: > 是固定的其中包括Bgl II 而且kit裡有附Bgl II enzyme
: > 拜託大家了
: plasmid和 plasmid ligate在一起結果會很奇怪
: 為甚麼要這麼做呢?
target gene 在既有的plasmid上
現成的vector上的restriction enzyme sites
: 是固定的 其中包括Bgl II 而且kit裡有附Bgl II enzyme
commercialized vector 包含reporter gene
手上的plasmid要加兩個Bgl II sites才能把target gene 切下來並和
commercialized kit裡的vector 作ligation
有勞大家讀完
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※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc)
◆ From: 68.43.122.205
1F：推 blence:傳統的做法是設計兩端帶有BglII的primer做PCR再接過去,或者 07/05 02:13
2F：→ blence:把target跟vector切下來後先blunt處理,再黏起來 07/05 02:16
3F：→ blence:反倒很少用你上述方法,尤其遇到vector都不適切時你怎麼辦？ 07/05 02:19
4F：推 oddesy:thanks 07/05 07:29
※ 編輯: oddesy 來自: 68.43.122.205 (07/05 07:36)
5F：推 oddesy:kit說明書寫這個vector可以被Bgl II切 07/05 07:39