作者oddesy (马车从天上掉下来 N)
看板Biotech
标题Re: [方法] 如何在plasmid上加Bgl II sites?
时间Thu Jul 5 01:38:21 2007
※ 引述《[email protected] (JUAN)》之铭言：
: ※ 引述《[email protected] (马车从天上掉下来 N)》之铭言：
: > 回到家可以打中文了 呼呼
: > 我没有作 mutation 想在plasmid 上加Bgl II sites
: > 我需要在我的plasmid上加上两个Bgl II sites 才能跟厂商卖
: > 的vector作ligation
: > 会有这个限制是因为现成的vector上的restriction enzyme sites
: > 是固定的其中包括Bgl II 而且kit里有附Bgl II enzyme
: > 拜托大家了
: plasmid和 plasmid ligate在一起结果会很奇怪
: 为甚麽要这麽做呢?
target gene 在既有的plasmid上
现成的vector上的restriction enzyme sites
: 是固定的 其中包括Bgl II 而且kit里有附Bgl II enzyme
commercialized vector 包含reporter gene
手上的plasmid要加两个Bgl II sites才能把target gene 切下来并和
commercialized kit里的vector 作ligation
有劳大家读完
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※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
◆ From: 68.43.122.205
1F：推 blence:传统的做法是设计两端带有BglII的primer做PCR再接过去,或者 07/05 02:13
2F：→ blence:把target跟vector切下来後先blunt处理,再黏起来 07/05 02:16
3F：→ blence:反倒很少用你上述方法,尤其遇到vector都不适切时你怎麽办？ 07/05 02:19
4F：推 oddesy:thanks 07/05 07:29
※ 编辑: oddesy 来自: 68.43.122.205 (07/05 07:36)
5F：推 oddesy:kit说明书写这个vector可以被Bgl II切 07/05 07:39