作者HIBERNICE (simple life !!)
看板Biotech
標題[問題] construct 換fusion-tag後 western 偵測不到??
時間Sat Jun 23 01:26:41 2007
我將一個deletion 的gene 原本是N端有MYC tag 的construct
換成FLAG tag construct 之後
transfect 細胞
直接取細胞溶解液 做western anti-flag
卻看不到band
但是 一樣是N端帶有FLAT WT卻可以看到band
而且 原本construct在MYC 的deletion form
也可以在anti-MYC的western被偵測到
我有去檢查在FLAG-deletion 的construct
DNA序列是in frame 中間也沒有出現 stop codon
請問有人遇到類似的情況嗎??
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◆ From: 140.129.62.213
※ 編輯: HIBERNICE 來自: 140.129.77.129 (06/23 11:43)
1F：推 elite1205:檢查過myc附近是否有start codon被破壞嗎 06/23 14:10
2F：推 HIBERNICE:你是指FLAG的start codon嗎? 它是好的 06/23 17:33