作者driws (自由 呼吸 存在)
看板Biotech
標題[問題] BrdU assay
時間Sun May 27 01:30:14 2007
近來很努力的在做cell proliferation 的實驗
想要請問有沒有人有做BrdU incorporation的實驗看過
我最近嘗試在做 跟羅氏買了他們的kit
書名書上最後指示說 用波長405nm的去測量吸光值 但最後又加了一句
"with a reference of 490nm"
這代表什麼意思呢?
因為我單看405的有增加 但是490nm測出來的卻不在機器的線性範圍內
讓我十分困擾 不知道這個490是否是用來校正的
另外就是還有MTT/MTS兩種也滿普遍的assay
不知道是否也有人做過 那跟BrdU比起來 哪個比較好做呢?
謝謝回答!
--
※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc)
◆ From: 211.74.96.83
※ 編輯: driws 來自: 211.74.96.83 (05/27 01:30)
1F：推 bb89233:MTT...>類似ELISA法...還蠻簡單可大量做 05/27 08:02
2F：推 diameter:比起MTT，BrdU還比較像ELISA，有Ab-Ag interaction哩! 05/27 11:38
3F：→ diameter:這兩種方法只差在detection時操作上的差異，MTT較簡單 05/27 11:40
4F：→ diameter:但是就sensitivity而言，BrdU較高，但成本也較高! 05/27 11:41
5F：→ diameter:還有另ㄧ種WST-1，敏感度也不錯，操作簡單，但成本高 05/27 11:43
6F：推 blence:BrdU是測通過S phase期的細胞數目,而MTT,WST,MTS等都是測量 05/27 12:55
7F：→ blence:細胞內NADPH的值,代表量測期間的相對細胞數目,所以在決定哪 05/27 12:57
8F：→ blence:個實驗之前,先想想你的實驗要回答哪什麼問題 05/27 13:00
9F：推 hicage:推MTT assay便宜迅速!! 05/27 19:45
10F：推 driws:感謝大家~ 05/27 22:44
11F：推 iiidns:MTT--檢測活細胞 BrdU-檢測"新生"細胞 05/28 11:16
12F：→ iiidns:BrdU也可用IHC的方式呈現結果 MTT相對下簡單又快 05/28 11:17