lysis buffer的目的只是在把細胞弄破讓裡面的protein流出來 還有維持protein的穩定而已 所以要用什麼基本上是要看你想粹取的protein在那個位置 還有這個protein自己本身的特定 來決定lysis buffer的組成 刮刀reuse用酒精噴一下然後擦乾淨就可以了 你也可以拿去用水洗 如果要用清潔劑 記得沖乾淨就好 你學長用的第一種把兩個lysis buffer混在一起 後面那個藍色的應該是loading buffer 測protein concentration的時候 BCA跟Bradford 對於detegent還有一些離子的忍受度不一樣 我猜是因為這個原因 所以才會先測完濃度之後 才把dye放進去 ※ 引述《[email protected] (六百)》之銘言： : ※ 引述《[email protected] (墮天使)》之銘言： : > 感謝你的回應。 : > 所以通常lysis是只分說要不要跑磷酸化嗎？沒磷酸化就通通RIPA這樣嗎？ : 就我所知 RIPA 用在磷酸化蛋白質上沒有什麼特殊的問題 : 不過也有人說 偵測磷酸化如果碰上問題 可以換用別種 buffer 這方面我就不太了解了 : > 另外請問嚕well時要怎麼知道細胞有破的很完全？會不會有細胞沒破或是根本沒括下來 : > 的情況？ : 有沒有刮下來應該可以用肉眼看 : 或是用顯微鏡看 : 刮下來以後根本沒在怕破不破啦 : 全部拿去煮一煮還有不破的道理？ XD : > 還有，因為我這邊括刀只有三把，如果reuse的話，要怎麼知道有沒有洗乾淨？肥皂塗 : > 一下沖一下，再用tissue擦乾可以嗎？ : 可以吧 我想不出來那有什麼特別的 甚至未必需要無菌啊 : 不過我都會拿漂白水泡一下 圖個心安 --

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