作者ameilover (思考該走的方向)
看板Biotech
標題[方法] 請問strategene的mutagenesis kit幾個問題
時間Wed Mar 7 23:50:07 2007
最近要做mutagenesis了
但是看他裡面附的protocol有些問題
1. 關於Dpn1: protocol說要把Dpn1從mineral oil底下吸起來(我看完的理解是這樣)
要用"pointed pipet tip" 請問那個東西一定要用嗎？ 可以跟誰買呢
2. NZ amine:我找了很多間公司，還沒看到一個完全符合名字的產品
有很多名字很像的，但是又不曉得到底差在哪裡，哪間公司的好用也不知道
請問有哪間公司可以直接買到NZY+ broth？ 拜託大家跟我推薦一家吧
3.tetracycline: protocol說那個competent cell是抗tetracycline的
所以就不能選擇有同樣抗藥性的plasimd 是為了避免沒有selection的效果嗎？
我是實驗室第一個做這個實驗的人
附近的實驗室也沒有人在做@@
請有經驗的版友們可以跟我分享一下操作上的經驗嗎？
謝謝
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◆ From: 125.229.40.84
1F：推 yadayada:要把Dpn1加到mineral oil底下的PCR reaction中(而非吸起) 03/08 12:36
2F：→ yadayada:也可以用其他的competent cell，並非一定要用該kit附的 03/08 12:39
3F：推 aceliang:我做完整個KIT十次反應連個屁都沒有...差點被殺死...貴耶 03/08 19:05
4F：推 FlarePhoenix:可考慮改用Finnzyme Phusion site-directed kit 03/10 22:03
5F：→ FlarePhoenix:好處是可以先檢驗primer是否能夠有PCR product在做 03/10 22:04