作者suncloth (春風面紙染秋意)
看板Biotech
標題[問題] 請問加上His tag DNA sequence 的方法
時間Wed Feb 28 16:56:40 2007
因為想在病毒的其中一個蛋白質n端加上his tag方便偵測,
要讓病毒在感染複製時都跟著表現,
所以沒法使用表達his tag的載體.
想請問一下大家,
可以直接在primer上加上ATGCAUCAUCAUCAUCAUCAUATG.... 總共約30~35mer的primer
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六個HIS的code 病毒蛋白質code
然後做pcr再置換入病毒基因嗎?
另外我注意到更小的tag 是poly-arg,
但是好像比較少人用,
antibody 也是his tag的較多,
有其他更小的tag嗎?
大家有什麼看法呢?
請多多指教,
謝謝回答.
大感謝.
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◆ From: 140.123.86.66
1F：推 aggaci:可以 02/28 17:33
2F：推 freshing:可以 +1 02/28 18:11
3F：推 jazzdevil:用過幾次 都用外加histag的方式 02/28 21:32
4F：→ jazzdevil:不過你可以參考commercial的vector來設計..有些不會用 02/28 21:35
5F：→ jazzdevil:連六個一樣的codon,會在第二四六的第三鹼基上換wobble 02/28 21:36
6F：→ jazzdevil:base, 畢竟一段sequence裡面有太多重覆的 總覺得不大好 02/28 21:39
7F：推 suncloth:嗯嗯,謝謝各位熱心的回答.要趕快來試試. 02/28 22:36