※ 引述《tirecake (三跪九扣三跪九叩)》之銘言： : ※ 引述《isotoper (想必是酸酸甜甜的吧)》之銘言： : : 看起來的確像是細菌污染沒錯 : : 不過有放大倍率更大的圖嗎? : 我有照過 但200X就看不到點點呈黑色了 看起來微凸黏在DISH : 不會動!!!!!!!! : http://www.wretch.cc/album/show.php?i=foodfood&b=2&f=1319306503&p=1 : 黑點點放大照 : http://www.wretch.cc/album/show.php?i=foodfood&b=2&f=1319306502&p=0 : 健康照 : http://www.wretch.cc/album/show.php?i=foodfood&b=2&f=1319306506&p=4 : 較低倍照 : http://www.wretch.cc/album/show.php?i=foodfood&b=2&f=1319306535&p=33 : 黑點點放大+細胞 : : 仔細看的話,細菌污染在細胞外會有顫動的小黑點 : : 如果是真菌汙染,大部分比較多yeast污染 : : 看起來在細胞外會有比細胞小的許多小圓球聚集成團 : : 據說黴漿菌汙染比較難辨別,因為黴漿菌又比一般細菌還小 : 我也覺得黴漿菌不會大到我用100X就看得到 是否是霉漿菌污染 可以用PCR check 有市售的kit 還滿容易使用的~~ ^^ 也可以用一般做免疫螢光染色的方法 將細胞種在玻片上 固定 穿孔 不過不用加一抗二抗 只要染DNA (如hochest 33258) 再用油鏡看有沒有大量的藍色小點 (不過這個方法 可以看到時 代表已經污染的非常嚴重了XD) : yeast好像會讓medium看起來沙沙的 : 但我的medium其實沒有變酸 細菌偏酸 yeast污染 medium是會變成粉紅色(偏鹼)霧狀 高倍數可以看到出芽(這是yeast污染最明顯的特徵~) : 我還上網找過污染的圖 不過都沒看過這種情形 : 說是代謝物 或是細胞碎片應該也沒有像黑點點這麼規則 這麼多 : 我的不會o/n就爆發 要4~5天不換medium才會肉眼看見半透明的霧狀片漂浮 : 那些片 是整片移動 點點不會自轉也不會震動~~ 整片飄起來 應該是死掉的細胞吧:p 用高倍看看吧~^^ (邊邊毛毛的有菌絲 那就是真菌啦!!) : : 知道是哪種細菌,有相對應的方法解決 : : 如果這盤細胞真的很重要 : : 事情就不是重養那麼簡單了 : : 能的話,會希望能夠將污染情況降低(完全去除是不可能的) : : 然後才能做實驗 : : 但如果這盤細胞不是太重要,絕大多數都直接重養吧 : 我都有加P/S! : MEDIUM跟SUPPORT都是廠商買一組兩罐 很好配 碩士班時的實驗室也有養huvec 我們也有遇過類似的情形>"< 那時問老闆也問不出所以然 後來是只要遇到這種情形 那批細胞丟掉 --

※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 210.58.169.35 ※ 編輯: JeffreyS 來自: 210.58.169.35 (01/31 16:37) ※ 編輯: JeffreyS 來自: 210.58.169.35 (01/31 16:41)