※ 引述《yussing (藍色天空)》之銘言： : ※ 引述《tirecake (三跪九扣三跪九叩)》之銘言： : : http://www.wretch.cc/album/show.php?i=foodfood&b=2&f=1319306505&p=0 : : 正常 : : http://www.wretch.cc/album/show.php?i=foodfood&b=2&f=1319306506&p=1 : : 養的代數多了就會開始有點點 : : 那些點點是什麼啊 : : 一開始是一群一群數十顆 : : 過四五天就會很多 但medium卻沒有什麼變化 : : 原本這細胞的代謝物就很多　但這些點點是貼盤的 : : 多到一種程度會整片漂起來 開始影響細胞生長 : : 我的細胞是primary culture　現在約八代　長得超慢 看起來的確像是細菌污染沒錯 不過有放大倍率更大的圖嗎? 仔細看的話,細菌污染在細胞外會有顫動的小黑點 如果是真菌汙染,大部分比較多yeast污染 看起來在細胞外會有比細胞小的許多小圓球聚集成團 據說黴漿菌汙染比較難辨別,因為黴漿菌又比一般細菌還小 : 我也是culture的新手 : 最近常爆發的污染也是像你圖內的樣子 : 一開始以為是黴菌,(聽說黴菌初期感染也是黑黑一團,像Totoro裡面那個小黑蟲@@) : 後來有個學長跟我說是細菌感染... : 結果我今天有一盤也是爆發了, : 就是細胞都貼在底下,但是在細胞上方飄了一大片霧黑黑的點點 : 後來我用10x的鏡頭盯著看,發現其實整團裡面都在扭動!!! : 所以是細菌啦 : 我還有爆發另一種細菌 : 我的細胞貼在底部,然後在細胞的旁邊會有黑點點,然後就在細胞旁邊一直小打轉, : 不然就是黑點點一直會輕微的一直去撞我的細胞 T^T : 其實就是細菌啦 : 因為學長說 就算是細胞的廢棄物..也不會這麼多(一個overnight就變這樣) : 請問,是什麼細菌很重要嘛?? : 如果是黴漿菌....有代表什麼意思嘛??? 知道是哪種細菌,有相對應的方法解決 如果這盤細胞真的很重要 事情就不是重養那麼簡單了 能的話,會希望能夠將污染情況降低(完全去除是不可能的) 然後才能做實驗 但如果這盤細胞不是太重要,絕大多數都直接重養吧 : 對了,還有個問題,就是每次passage要換到新的plate嘛?? : 因為我些同事說用trpsin收下來 要再passage就換個新的plate長 : 可是有些就說重複使用同一個plate就可以了...可以請問有什麼差異嘛??? : 我的污染這陣子也是很嚴重 Orz 不懂,重複使用同一個plate的意思是? trypsin收下來之後再種回去? plate中還是無法避免有trypsin殘留吧(用buffer洗掉?) 通常trypsin如果存在太久,對細胞有殺傷力 更不用說細胞貼不上去了 另外,如果plate中的細胞沒有全部被洗下 那把細胞種回去,plate內就有不同代數的細胞了 無論如何,我覺得還是不要重複使用同一個plate好 純屬個人感想 --

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