作者tirecake (三跪九扣三跪九叩)
看板Biotech
標題Re: [問題] 我養的huvec有怪點點
時間Tue Jan 30 09:19:38 2007
引述《tirecake (三跪九扣三跪九叩)》之銘言：
: http://www.wretch.cc/album/show.php?i=foodfood&b=2&f=1319306505&p=0
: 正常
: http://www.wretch.cc/album/show.php?i=foodfood&b=2&f=1319306506&p=1
: 養的代數多了就會開始有點點
: 那些點點是什麼啊
: 一開始是一群一群數十顆
: 過四五天就會很多 但medium卻沒有什麼變化
: 原本這細胞的代謝物就很多 但這些點點是貼盤的
: 多到一種程度會整片漂起來 開始影響細胞生長
: 我的細胞是primary culture 現在約八代 長得超慢
推 sakuru:細菌污染，我之前就是這樣子
→ sakuru:或是黴菌，你的medium應該會很快變黃吧?!
推 sakuru:而且你的細胞不太純的樣子耶，細胞濃度也太低了，會長不好
就是因為medium不太有變化 所以我才困惑
我看過污染到medium變色 裡頭有沙沙的混濁物 但跟我現在情形不同
細胞不太純?會不會是我的細胞變性了?(變成fibroblast) 因為這陣子我只養一種
濃度低是因為1.老代數了細胞變很大 2.點點的影響
推 apa9394:fibroblast SUBCULTURE 最好打成１顆顆的聚集成一片
→ apa9394:一開始就有一小片的話有些其實已經不是monolayer...
→ apa9394:那團非"monolayer"會整團漂起來．．．
我整片漂起來的不是細胞 是那些點點
而黴漿菌汙染應該不容易看吧(應該比我的點點更小?) 我們是用倒立顯微鏡PH1看
黴漿菌在專用AGAR上有荷包蛋狀Colony
該不會是我之前上食研所的課 帶了sample回來污染到了
可是年輕細胞都不會有事 解凍後養三四代都很好 7~8代就開始了
另外我還想問
我的細胞會變大變老 以至於8代以後很難長滿
我們老師要我常常subculture這樣對嗎 一週一次-->一週兩次,且不是分盤,是重新seed回
因為每次叫起來再貼下去 就會犧牲掉一些細胞
代數增加很快 盤數卻沒有增加 不是更快到達細胞的壽命嗎
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駕一葉之扁舟 舉袍樽以相屬
寄蜉蝣於天地 渺滄海之一粟
哀吾生之須臾 羨長江之無窮
挾飛仙以遨遊 抱明月而長終
知不可乎驟得 託遺響於悲風
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※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc)
◆ From: 61.62.195.21
1F：推 apa9394:前面污染的問題我沒看到無法解釋... 01/30 09:44
2F：→ apa9394:後面subculture的思考方式我覺得要考慮至少要多少能長... 01/30 09:45
3F：推 ceci:我覺得有點像死細胞碎片 01/30 09:54
4F：推 apa9394:我也是覺得是細胞碎片... 01/30 12:40
5F：推 dlink:依我養huvec的經驗,我覺得像是污染。 而至於subculture的 01/30 19:45
6F：→ dlink:問題, 一般實驗室使用huvec大約都只用到第五代 01/30 19:46
7F：→ dlink:，除非有特殊目的。所以你要不要先跟你們老師討論一下代數 01/30 19:46
8F：→ dlink:的問題呢？ 確定一下他是不是另有目的... ^^ 01/30 19:47
9F：推 sakuru:你把細胞trypsin下來又種回去的目的在哪 ?? 01/30 21:58
10F：推 tirecake:我們老師說這樣比較不會老 01/30 23:45
11F：→ tirecake:但我覺得這樣的說法怪怪的 01/30 23:45