作者tirecake (三跪九扣三跪九叩)
看板Biotech
標題[問題] 我養的huvec有怪點點
時間Mon Jan 29 15:51:52 2007
http://www.wretch.cc/album/show.php?i=foodfood&b=2&f=1319306505&p=0
正常
http://www.wretch.cc/album/show.php?i=foodfood&b=2&f=1319306506&p=1
養的代數多了就會開始有點點
那些點點是什麼啊
一開始是一群一群數十顆
過四五天就會很多 但medium卻沒有什麼變化
原本這細胞的代謝物就很多 但這些點點是貼盤的
多到一種程度會整片漂起來 開始影響細胞生長
我的細胞是primary culture 現在約八代 長得超慢
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◆ From: 203.64.247.100
1F：推 enisx:細菌污染?? 01/29 16:06
2F：推 enisx:還是血清的沉澱物...(有請其他高手解答吧 -_-) 01/29 16:10
3F：推 ilyz25:HUVECs不是只用三到七代嗎? 會不會是養太多代...我們家只用 01/29 17:00
4F：→ ilyz25:只用到第三代...還有我的 dish有額外 coating gelatin! 01/29 17:02
5F：推 tirecake:我想請問細菌是不是會有布朗運動 因為點點是貼盤不動的 01/29 19:55
6F：→ tirecake:且這些點點不太會"爆發",我一週SUBCULTURE一次 01/29 19:56
7F：推 iiidns:感覺類似細胞死掉以後的碎片 我的細胞也曾經這樣過 ~.~ 01/29 22:03
8F：推 sakuru:細菌污染，我之前就是這樣子 01/29 23:29
9F：→ sakuru:或是黴菌，你的medium應該會很快變黃吧?! 01/29 23:30
10F：推 sakuru:而且你的細胞不太純的樣子耶，細胞濃度也太低了，會長不好 01/29 23:33
11F：推 apa9394:fibroblast SUBCULTURE 最好打成１顆顆的聚集成一片 01/30 00:43
12F：→ apa9394:一開始就有一小片的話有些其實已經不是monolayer... 01/30 00:45
13F：→ apa9394:那團非"monolayer"會整團漂起來．．． 01/30 00:46
14F：→ apa9394:trypsin作用完後離心去除trypsin-medium mix後 01/30 00:47
15F：→ apa9394:加入fresh new medium 打散細胞後靜置１分鐘讓非單顆的 01/30 00:48
16F：→ apa9394:細胞沉下去 吸取suspension seeding 留下下面約3-5ml丟棄 01/30 00:49
17F：→ apa9394:3-5小時後看細胞貼附的狀況有無細胞碎片決定要不要換 01/30 00:51
18F：→ apa9394:medium...要污染３小時就夠了．．． 01/30 00:53
19F：→ apa9394:BTW那些小點點 小弟覺得是污染...但是跟第一張的小黑點 01/30 00:55
20F：→ apa9394:無關...因為第一張看起來像血清的沉澱物or apoptotic body 01/30 00:56
21F：→ apa9394:但第２張是我常看到的污染...而且是跟動物有關的... 01/30 00:57
22F：→ apa9394:因為小弟實驗室也是in vitro+in vivo... 01/30 00:57
23F：→ apa9394:個人經驗僅供參考...但是有用的話麻煩跟小弟說一聲 01/30 00:58
24F：→ apa9394:因為最近也是被新來的弄得很煩..new comer=contamination? 01/30 00:59