作者iceoo (醉心於巴黎)
看板Biotech
標題[問題] 關於Ni2+ column
時間Wed Jan 10 01:24:08 2007
請問一下 在用imidazole洗純化之蛋白質的時候
因為用1M imidazole去洗還是得不到我要的蛋白質
(用SDS-PAGE沒壓到 但pri-bind有壓到)
所以就再提高imidazole的濃度 當提高到2M時
在洗的過程中 帶有Ni2+的 resin逐漸由綠色轉為紫色
請問是為什麼呢 我再用PBS wash後 又恢復成綠色了
thx!
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莫聽穿林打葉聲，何妨吟嘯且徐行。
竹杖芒鞋輕勝馬，誰怕？一簑煙雨任平生。
料峭春風吹酒醒，微冷，山頭斜照卻相迎。
回首向來蕭瑟處，歸去，也無風雨也無晴。
~~~《定風波》~~~
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◆ From: 61.230.67.83
1F：推 Bluecold:pH? 01/10 06:49
2F：推 aggaci:沒結合上去吧?通column前後，target protein量有改變嗎? 01/10 14:19
3F：推 wensing:用到1M imidazole相當高濃度！ 01/10 18:00
4F：→ wensing:我只用300mM就可以洗下來了！ 01/10 18:01
5F：推 alaric:你的cell extracts有表現? 01/10 21:27