作者hychou (布丁)
看板Biotech
標題[問題] Relative Q-PCR
時間Mon Dec 25 10:44:13 2006
板上前輩們好:
最近因為要同時進行6個基因的mRNA定量
使用real-time PCR, 雖然做相對定量
但仍使用細胞株A562的cDNA做為standard
想請問有standard的情形下,
是否reference gene (GAPDH)與target gene可以在不同run進行?
並且每個target gene都可以用同一盤GAPDH的結果去normalize?
另外,如果target gene為low copy number
是不是可以先行跑5個循環左右
再把這些PCR product做real-time PCR
如果我的概念有問題,還請前輩們指正.
感激不盡 ^^
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※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc)
◆ From: 163.29.223.22
※ 編輯: hychou 來自: 163.29.223.22 (12/25 10:45)
1F：推 qqo8855436:target 跟 internal可以在不同run跑 12/29 22:22
2F：→ qqo8855436:我的經驗....low copy不至於會[偵測不到 所以不需先跑 12/29 22:23
3F：→ qqo8855436:要用同一管的cDNA去跑TARGET跟internal (以上參考) 12/29 22:24