※ 引述《[email protected] (黑點)》之銘言： > 我好像有點被搞混了，能請問一下cDNA amplify的過程 > 中這兩種kit的差別在哪？ > 1) First-Strand Synthesis > 2)One-Step RT-PCR System > 是我的誤解嗎？我會以為這兩種系統的差異是在 > 第一個他是針對total RNA來amplify全長的cDNA出來。 > 而第二個系統是針對，特異性的片段來amplify。 > 能否請知道的大大解釋一下！！謝謝 就我所知道的回答看看,有錯誤請指證 我想你應該指的是RT-PCR two steps 跟one step的差異吧? Two steps 基本上跟你說差不多,是針對Total RNA amplify cDNA 所以是使用Oligo-dT當作primer,再利用reverse transcriptase反轉錄成cDNA amplify出來的是total cDNA,然後再用這cDNA, 以specific primer去PCR amplify所要的片段 One step 只是將reverse transcriptase 和 taq mix在一起的混合 所以直接以specific的primer加入,先以低溫作reverse transcription, 再以高溫作PCR amplification, 祇是一開始就是以specific的primer作cDNA而已 應該差不多是這樣吧 -- ◤◥ Origin: 中央生科˙生生不息 nculs.twbbs.org.tw ◣◢ Author: zoarlu 從 140.109.56.171 發表