作者pacity ()
看板Biotech
標題[問題] 關於挑選stable clone
時間Thu Feb 16 14:33:46 2006
想請問有挑過stable clone的板友
在 transfection 前 會先把plasmid linearize嗎??
因為之前我們都有先經過linearize
用RE先切一刀(在不影響target gene以及相關functional gene 的位置)之後
再進行transfect
這樣挑到要的細胞的效率會差一點
但是會比較stable 不會只有以episome的狀態存在
(以上是我們一直以來的認知@@")
但是實驗室也有學姐的做法是不切的 好像也是可以
所以想問一下其他實驗室的狀況以及經驗~~
感謝分享:)
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※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc)
◆ From: 140.129.74.200
1F：推 blence:做repair實驗就會知道，就算切斷,也會有enzyme把它黏起來的 02/16 15:02
2F：推 pacity:喔喔 原來.. 不過有看到一些挑stable clone的protocol 02/16 15:40
3F：→ pacity:說要先linearize就是... 恩 先感謝分享:) 02/16 15:42