作者huangsw (Orz)
看板Biology
標題Re: [問題] 這樣E-coli有受到污染嗎？
時間Tue Feb 18 21:24:51 2020
※ 引述《physics11 (11號)》之銘言：
: 【問題】：這兩個月來好幾次做實驗
: 塗完盤後E coli的菌都長這樣
: http://i.imgur.com/4tDXz49.jpg
: （圖中的菌種已經序列稀釋到10^-7次方了）
: 這個e coli真的是e coli嗎？
: 【問題起因】：
: 去年11月做實驗還很正常，但12月開始就有幾盤的菌落數不出來（暈開成這樣根本沒辦法數）
: 目前嘗試改進手法、
: 用去年七月繼代的菌來塗盤，
: 也都是得到類似的結果，
: 甚至稀釋到-8次方也是有同樣的現象
: 【個人看法】：
: 老實說，這根本不是我印象中e coli的morphology，
: 雖然在research gate上有人說這很正常，學長也跟我我這只是e coli長太大了要我再稀釋，但是都稀釋到-8次方了也數不出來，我打從心底覺得一直稀釋也不是解決的辦法，故上來請教各位先進
: 【參考資料/連結】：無
先問幾個基礎問題, 看起來你是自己配的agar plate,
1.你可以試著把plate直接丟去培養看看是否會長菌嗎？
2.你的細菌濃度是怎麼訂出來的？600nm Absorbance?
你是基於McFarland standard的基礎去做實驗嗎？
3.你序列稀釋有換tip嗎？ tip是否只插入液面下方一點點 還是整支插進去broth內？
以上可以可以給你一些方向參考一下
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1F：推 physics11: 不好意思，小弟近日業務繁忙，現在才看到這篇回文 02/26 23:06
2F：→ physics11: 1.單純丟plate不會長東西，無論是在hood還是在incubato 02/26 23:06
3F：→ physics11: r都不會有這樣的現象 02/26 23:06
4F：→ physics11: 2.用plate count的方式，稀釋後塗盤數菌落，至於大大提 02/26 23:06
5F：→ physics11: 及的McFarland我們沒有做這些 02/26 23:07
6F：→ physics11: 3.序列稀釋都有換tip 02/26 23:07
7F：→ physics11: 我每次都是吸取液面下一點而已沒有整支伸進去（我們的p 02/26 23:08
8F：→ physics11: ipette會跟tube卡住） 02/26 23:08
9F：→ physics11: 但是吸取前都會vortex 15秒 02/26 23:08
10F：推 Ice9: 養幾小時？ 02/28 01:11
11F：推 physics11: 回樓上大大，養24小時 03/08 19:04
13F：→ physics11: pg 03/17 17:20
14F：→ physics11: 已經放棄希望了 03/17 17:20
16F：推 Ice9: 養太久 03/18 01:37
17F：→ Ianthegood: 這是transformation嗎? 然後沒有在養整天的啦你在種 03/19 00:46
18F：→ Ianthegood: 菜逆 16小時以內要收 03/19 00:46
19F：→ physics11: 回覆樓上大大，可能真的是養太久了，我會試試看在16小 03/19 01:21
20F：→ physics11: 時內操作完，但是之前放24小時沒有出現這樣的情況 03/19 01:22
21F：→ physics11: 然後這不是transformation 03/19 01:22
22F：推 Ianthegood: 不是transformation是什麼？劃glycetol stock嗎?那你 03/21 08:17
23F：→ Ianthegood: 怎麼會不劃象限還用塗的難怪長成這樣啊 03/21 08:17