作者huangsw (Orz)
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标题Re: [问题] 这样E-coli有受到污染吗？
时间Tue Feb 18 21:24:51 2020
※ 引述《physics11 (11号)》之铭言：
: 【问题】：这两个月来好几次做实验
: 涂完盘後E coli的菌都长这样
: http://i.imgur.com/4tDXz49.jpg
: （图中的菌种已经序列稀释到10^-7次方了）
: 这个e coli真的是e coli吗？
: 【问题起因】：
: 去年11月做实验还很正常，但12月开始就有几盘的菌落数不出来（晕开成这样根本没办法数）
: 目前尝试改进手法、
: 用去年七月继代的菌来涂盘，
: 也都是得到类似的结果，
: 甚至稀释到-8次方也是有同样的现象
: 【个人看法】：
: 老实说，这根本不是我印象中e coli的morphology，
: 虽然在research gate上有人说这很正常，学长也跟我我这只是e coli长太大了要我再稀释，但是都稀释到-8次方了也数不出来，我打从心底觉得一直稀释也不是解决的办法，故上来请教各位先进
: 【参考资料/连结】：无
先问几个基础问题, 看起来你是自己配的agar plate,
1.你可以试着把plate直接丢去培养看看是否会长菌吗？
2.你的细菌浓度是怎麽订出来的？600nm Absorbance?
你是基於McFarland standard的基础去做实验吗？
3.你序列稀释有换tip吗？ tip是否只插入液面下方一点点 还是整支插进去broth内？
以上可以可以给你一些方向参考一下
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1F：推 physics11: 不好意思，小弟近日业务繁忙，现在才看到这篇回文 02/26 23:06
2F：→ physics11: 1.单纯丢plate不会长东西，无论是在hood还是在incubato 02/26 23:06
3F：→ physics11: r都不会有这样的现象 02/26 23:06
4F：→ physics11: 2.用plate count的方式，稀释後涂盘数菌落，至於大大提 02/26 23:06
5F：→ physics11: 及的McFarland我们没有做这些 02/26 23:07
6F：→ physics11: 3.序列稀释都有换tip 02/26 23:07
7F：→ physics11: 我每次都是吸取液面下一点而已没有整支伸进去（我们的p 02/26 23:08
8F：→ physics11: ipette会跟tube卡住） 02/26 23:08
9F：→ physics11: 但是吸取前都会vortex 15秒 02/26 23:08
10F：推 Ice9: 养几小时？ 02/28 01:11
11F：推 physics11: 回楼上大大，养24小时 03/08 19:04
13F：→ physics11: pg 03/17 17:20
14F：→ physics11: 已经放弃希望了 03/17 17:20
16F：推 Ice9: 养太久 03/18 01:37
17F：→ Ianthegood: 这是transformation吗? 然後没有在养整天的啦你在种 03/19 00:46
18F：→ Ianthegood: 菜逆 16小时以内要收 03/19 00:46
19F：→ physics11: 回覆楼上大大，可能真的是养太久了，我会试试看在16小 03/19 01:21
20F：→ physics11: 时内操作完，但是之前放24小时没有出现这样的情况 03/19 01:22
21F：→ physics11: 然後这不是transformation 03/19 01:22
22F：推 Ianthegood: 不是transformation是什麽？划glycetol stock吗?那你 03/21 08:17
23F：→ Ianthegood: 怎麽会不划象限还用涂的难怪长成这样啊 03/21 08:17