※ 引述《shingo123 (shingo)》之銘言： : ※ 引述《[email protected] (想以玫瑰祭妳。)》之銘言： : : 有點看不懂你表達的 : : 酒精Wash完後以TE溶掉DNA pellet,再沉澱DNA?? : : 是要re-salting out嗎? : : 再說請楚點你的問題吧~ TE溶掉DNA後沒做特殊處理怎麼得到pellet.. : 加完TE後，還有加RNase A，然後再加1.6M NaCl放4度C讓它沉澱overnight，但隔天 : 再以top speed離心後，卻完全看不到pellet 我個人所做操作的是alkaline lysis的方法，也就是不用kit的 (因為老闆礙於經濟考量) 我是把７０％的EtOH air dry之後，直接以TE bf. ( contain 20 ug/ml的 RNase A, store in 4℃，目前以配了６個月，還是很好用！)　回溶。 我會在３７℃ dry bath incubation，１～２小時，提升RNase A的作用。 看閣下的目的，應該是為了要除去DNA solution中，大部份的RNase A，但是不加醇類 （ex.EtOH or 2-propanol）的鹽析方式，會讓DNA的回收率變差，我不知道會差多少，但 應是會差很多的！ 還有如果你也是用alkaline lysis的方法操作的話，你所看到的nucleic acid pellet， 會大部份都是RNA，所以如果說原來就不多，而RNase A作用完之後，沉澱完看不見Pellet ，也別太緊張，DNA還是存在的，只是相對於RNA的量來說太少，所以變成看不到；回溶完 ，跑片膠，你將會看到DNA在對你說: Hello......... -- 有錯，請指教！ --

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