※ 引述《shingo123 (shingo)》之铭言： : ※ 引述《[email protected] (想以玫瑰祭你。)》之铭言： : : 有点看不懂你表达的 : : 酒精Wash完後以TE溶掉DNA pellet,再沉淀DNA?? : : 是要re-salting out吗? : : 再说请楚点你的问题吧~ TE溶掉DNA後没做特殊处理怎麽得到pellet.. : 加完TE後，还有加RNase A，然後再加1.6M NaCl放4度C让它沉淀overnight，但隔天 : 再以top speed离心後，却完全看不到pellet 我个人所做操作的是alkaline lysis的方法，也就是不用kit的 (因为老板碍於经济考量) 我是把７０％的EtOH air dry之後，直接以TE bf. ( contain 20 ug/ml的 RNase A, store in 4℃，目前以配了６个月，还是很好用！)　回溶。 我会在３７℃ dry bath incubation，１～２小时，提升RNase A的作用。 看阁下的目的，应该是为了要除去DNA solution中，大部份的RNase A，但是不加醇类 （ex.EtOH or 2-propanol）的盐析方式，会让DNA的回收率变差，我不知道会差多少，但 应是会差很多的！ 还有如果你也是用alkaline lysis的方法操作的话，你所看到的nucleic acid pellet， 会大部份都是RNA，所以如果说原来就不多，而RNase A作用完之後，沉淀完看不见Pellet ，也别太紧张，DNA还是存在的，只是相对於RNA的量来说太少，所以变成看不到；回溶完 ，跑片胶，你将会看到DNA在对你说: Hello......... -- 有错，请指教！ --

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