作者allmerit (ring)
看板Biology
標題Re: [請益] 關於把Plasmid DNA從3M membrane上萃出 …
時間Mon Apr 10 20:13:46 2006
※ 引述《littleantant (一隻小螞蟻)》之銘言：
: 請教一下:
: 老闆丟了一個sample給我,是從國外要來的plasmid,好像是直接點在3M membrane上,
: 我的想法是直接把3M membrane放入tube內,加入65度C加溫的水或TE buffer,incubation
: 數小時後,取出跟competent cell mix利用heat shock的方式送入E. coli保存,
: 再利用抗生素篩選抽Plasmid,可是上次的經驗是失敗了,因為Plate根本沒有菌落長出來,
: 證明我elute DNA失敗,想請問各位前輩有沒從這種paper上elute DNA之經驗,可以傳授一下
: 嗎?
我之前也有從國外拿到類似的sample(不是膜而是紙)_
也是用ＴＥ去回溶 ６５度數小時 那我是以電穿孔的方式 後來有成功
你有沒有確定那個質體的marker跟你用的抗生素是對的壓(還有使用濃度)
或是它的host確定是E.coli對吧
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