作者allmerit (ring)
看板Biology
标题Re: [请益] 关於把Plasmid DNA从3M membrane上萃出 …
时间Mon Apr 10 20:13:46 2006
※ 引述《littleantant (一只小蚂蚁)》之铭言：
: 请教一下:
: 老板丢了一个sample给我,是从国外要来的plasmid,好像是直接点在3M membrane上,
: 我的想法是直接把3M membrane放入tube内,加入65度C加温的水或TE buffer,incubation
: 数小时後,取出跟competent cell mix利用heat shock的方式送入E. coli保存,
: 再利用抗生素筛选抽Plasmid,可是上次的经验是失败了,因为Plate根本没有菌落长出来,
: 证明我elute DNA失败,想请问各位前辈有没从这种paper上elute DNA之经验,可以传授一下
: 吗?
我之前也有从国外拿到类似的sample(不是膜而是纸)_
也是用ＴＥ去回溶 ６５度数小时 那我是以电穿孔的方式 後来有成功
你有没有确定那个质体的marker跟你用的抗生素是对的压(还有使用浓度)
或是它的host确定是E.coli对吧
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