作者hunnan (猴子嘰嘰叫)
看板Biology
標題Re: [問題] 關於western的電泳小問題
時間Thu Mar 23 10:46:08 2006
你跑的時候是不是把外面的buf灌滿?
漏出來有可能是因為外面的buf太滿 從內外槽相接的地方有個洞流出來的
可以檢查一下內槽是不是會漏buf
通常跑不動都是因為電路斷掉了
※ 引述《jedy (想去南極跟企鵝玩!)》之銘言：
: 其實已經是大問題了
: 因為實驗需求 所以跑western
: 跑了三次 但是總是遇到一些瓶頸
: 不知道要怎麼解決 所以上來尋求一些意見
: 我所使用的是全新的bio-rad的電泳和濕式transfer設備
: 但是當我在跑電泳的時候
: 所花的時間很長 5-6小時
: 這跟我以前在做western跑電泳的情形差很多
: 本來以為是Tris buffer或是running buffer的問題
: 因為這些是自己泡的
: 結果這次全部重泡一次的
: 一開始有跑得比較順
: 但是跑到中間又開始跑不動了
: 而且這幾次我發現我的running buffer會從電泳槽會有些漏出來
: （從外槽跟內槽連接的縫隙 不是外槽破掉 我check過了)
: 所以桌子會濕濕的
: 我在猜我的電泳會比較跑不動是不是跟那個running buffer漏出來有關呢
: 我跑的是brain tissue sample
: 利用的SDS-page 為10% resolving gel 5% stacking gel
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