作者hunnan (猴子叽叽叫)
看板Biology
标题Re: [问题] 关於western的电泳小问题
时间Thu Mar 23 10:46:08 2006
你跑的时候是不是把外面的buf灌满?
漏出来有可能是因为外面的buf太满 从内外槽相接的地方有个洞流出来的
可以检查一下内槽是不是会漏buf
通常跑不动都是因为电路断掉了
※ 引述《jedy (想去南极跟企鹅玩!)》之铭言:
: 其实已经是大问题了
: 因为实验需求 所以跑western
: 跑了三次 但是总是遇到一些瓶颈
: 不知道要怎麽解决 所以上来寻求一些意见
: 我所使用的是全新的bio-rad的电泳和湿式transfer设备
: 但是当我在跑电泳的时候
: 所花的时间很长 5-6小时
: 这跟我以前在做western跑电泳的情形差很多
: 本来以为是Tris buffer或是running buffer的问题
: 因为这些是自己泡的
: 结果这次全部重泡一次的
: 一开始有跑得比较顺
: 但是跑到中间又开始跑不动了
: 而且这几次我发现我的running buffer会从电泳槽会有些漏出来
: (从外槽跟内槽连接的缝隙 不是外槽破掉 我check过了)
: 所以桌子会湿湿的
: 我在猜我的电泳会比较跑不动是不是跟那个running buffer漏出来有关呢
: 我跑的是brain tissue sample
: 利用的SDS-page 为10% resolving gel 5% stacking gel
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