你可以去Nalgene買一種冷凍盒子(商品名 NALGENE Cryo 1度C Freezing Container) 此盒子分兩層 外層要加isopropyl alcohol(異丙醇) 冷凍小管放入此盒子內層再將此盒子放入-80度C 的冷凍櫃至少四小時 再將冷凍小管放入液態氮中 我的論文就是做冷凍新鮮分離的細胞的最佳條件 冷凍小管絕不能用無血清 血清可用50%或 70%(其實70%最好) 重點是解凍的程序很重要 關係存活率　其重要性不亞於冷凍的medium的比例 我的解凍程序是 Avarbock et al. 1996(Nature Medicine 2,pp 693-696,1996) 冷凍小管自液態氮中取出 放入38度C(因我的是雞的primary culture)解凍　約2分鐘內解凍完全 移入15 ml離心管中 一滴一滴(dropwise)將含10%血清之培養基(不同人用的medium培養基皆不同)加入 邊加邊搖動離心管　加入約三倍冷凍液量的體積(記得要加一滴就搖幾下) 即假如你的冷凍液是1CC 你就加3CC緩衝　但不能一下子加入3ｃｃ 要 加一滴就搖動離心管　慢慢加完 800g離心5min 倒掉上清液 以2CC含10%血清的培養基再次清洗細胞 800g離心5min 以trypan blue exclusion計算存活 將細胞養入flask > ==> [email protected] (somewhere i want to...) 的文章中提到: > 請問凍primary cell > 到底要用全血清還是無血清阿 和DMSO比例又是多少????? > 可不可以大家給我ㄧ個建議...謝謝各位 -- * Origin: 中山大學-美麗之島BBS * From: 220.142.91.175